Skip to content

Molekyl re tiln rminger til mikrobiell samfunnsanalyse.

Innholdsfortegnelse.

Introduksjon L ringsmal Nukleinsyreutvinning Polymeraskjedereaksjon (PCR) Sjekk din l ring Omvendt transkripsjon Sjekk din l ring Separering av fellesskap DNA-fragmenter Kloning Konformasjonsseparasjon Lengdeseparasjon Kontroller l ring DNA-sekvensering Sjekk din l ring Sammenlignende sekvensanalyse Probe-design og syntese Kontroller l ring Hybridiseringsmetoder Southern og Northern blot hybridisering Dot og slott blot hybridisering Colony blott hybridisering Fluorescerende in situ hybridisering (FISH) Microarrays Kvantitativ PCR Sjekk din l ring Identitet versus funksjon Fluorescerende in situ hybridisering (FISH) + Mikroautoradiografi (MAR) Stabil isotopprobe (SIP) Sjekk din l ring Konklusjoner Forfatter, bekreftelser, opphavsrett.

Southern og Northern blot hybridisering.

Southern blot-hybridisering refererer til deteksjon av spesifikke DNA-fragmenter som er blitt separert ved gelelektroforese (figur 1). Etter elektroforese blir de separerte DNA-fragmenter deaturert og overfort til et nitrocellulose (eller nylon) membranark ved blotting. I blottet blir gelen stottet pa en svamp i et alkalisk opplosningsbad, og buffer suges gjennom gelen og arket av papirhandkl r stablet pa toppen av nitrocellulose-arket. Bufferen denaturerer DNA'et og overforer de enkeltstrengede fragmentene fra gelen til overflaten av arket, hvor de festes fast. Nitrocellulose-arket som inneholder de bundne enkeltstrengede DNA-fragmentene, avleses av gelen og plasseres i en forseglet plastpose eller en boks sammen med buffer inneholdende merket DNA-probe som er spesifikk for mal-DNA-sekvensen. Platen eksponeres for sonden under betingelser som favoriserer hybridisering. Etter hybridiseringen fjernes arket fra posen, vaskes grundig for a fjerne uhybridiserte prober og betraktes ved hjelp av autoradiografi eller ultrafiolett lys avhengig av de benyttede etikettene (radioaktive av fluorescerende). En tilpasning av Southern blotting er Northern blotting, hvor RNA molekyler elektroforeses gjennom gelen i stedet for DNA.


Hallo! Vil du spille i det mest populære kasinoet? Vi samlet det for deg. Gå her nå!